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产品信息
| 适用范围 | 试剂 |
|---|---|
| 使用方法 | 人多能干细胞培养基制备： 1. 将人多能干细胞基础培养基提前恢复至室温，添加剂解冻后翻转混匀。 2. 然后将 10ml 添加剂无菌转移到 490ml 人多能干细胞基础培养基，混匀得到完全培养基。 3. 配制好的完全培养基可在 2°C-8°C 下储存 2 周。 人多能干细胞复苏： 1. 提前用基质胶包被 6 孔板，每孔内加入 1ml 基质胶轻轻晃动使其完全覆盖皿底，置于 37℃培养箱中孵育 1h~2h，实验前拿出并置于生物安全柜中室温下平衡 20 min。 2. 将多能干细胞完全培养基提前预热，取 5~10ml 加入 15ml 离心管中备用。 3. 将冻存的多能干细胞从液氮中取出，37°C 水浴中快速融化，当只剩下一块小冰晶时，将冻存管从水浴中取出，喷洒 70%的乙醇，然后放在生物安全柜中。 4. 将解冻的细胞转移到提前备好的含完全培养基的 15ml 离心管中，1000rpm 离心 3min。 5. 丢弃上清液，并将细胞沉淀重悬于 2ml 完全培养基混匀，将细胞悬液缓慢添加到基质胶包被的 6 孔板中，6 孔板的每个孔接种密度约 100 万个活细胞。 6. 轻轻晃动 6 孔板使细胞均匀分布，置于 37℃，5%CO2 培养箱培养。 7. 第 2 天观察细胞贴壁情况，更换新鲜培养基，此后每天更换培养基，直到细胞长至约 85% 汇合度。 人多能干细胞传代： 1. 将人多能干细胞培养基及消化液提前预热。 2. 弃掉原有培养基，贴壁缓慢加入 DPBS 清洗，然后沿培养皿边缘吸去 DPBS 缓冲液。 3. 每孔加入 1-2ml 人多能干细胞消化液使之覆盖皿底，并置于室温孵育 5-8min 或在 37°C 下孵育 4-5min（消化时间依据干细胞生长密度，消化时间略有不同，消化过程中可在显微镜下观察细胞消化情况，若在显微镜下观察到大部分克隆边缘以及克隆内部细胞间出现间隙，即可吸掉消化液终止消化）。 4. 将消化液吸掉后，加入 2ml 人多能干细胞培养基，用移液枪轻柔吹打 3~5 次，使皿底干细胞集落脱落，并将其并转移到 15mL 离心管中，少量残余的细胞集落没有脱落属于正常现象。 5. 添加适当体积的预热完全培养基到基质胶包被的 6 孔板中，将细胞悬浮液混匀后按一定比例接种至孔板中，轻轻晃动 6 孔板使细胞均匀分布，置于 37°C、5%CO2培养箱中培养过夜。 6. 第 2 天观察细胞贴壁情况，更换新鲜培养基，此后每天更换培养基，直到细胞长至约 85% 汇合度。 人多能干细胞冻存： 1. 将人多能干细胞培养基及消化液提前预热。 2. 弃掉原有培养基，贴壁缓慢加入 DPBS 清洗，然后沿培养皿边缘吸去 DPBS 缓冲液。 3. 每孔加入 1-2ml 人多能干细胞消化液使之覆盖皿底，并置于室温孵育 5-8min，或在 37°C 下孵育 4-5min。 4. 将消化液吸掉后，加入 2mL 人多能干细胞培养基，用移液枪轻柔吹打 3~5 次，使皿底干细胞集落脱落，并将其并转移到 15mL 离心管中，1000rpm 离心 3min。 5. 弃上清，加入无血清干细胞冻存液重悬，轻轻吹打混匀，转入到冻存管中。 6. -80℃冰箱冻存过夜后转入液氮中长期保存。 |
| 注意事项 | 1. 人多能干细胞培养基添加剂在室温或 2-8℃解冻，避免反复冻融。 2. 配制好的人多能干细胞完全培养基可在 2°C-8°C 下储存 2 周。 3. 传代后可见细胞碎片和小菌落是正常现象。 4. 使用本产品时应严格按照无菌操作的规程进行操作。 |
| 声明 | 仅用于科研使用，不能用于临床诊断和治疗。 |
| 保存条件 |
产品详情
诱导多能干细胞 (iPSCs) 和胚胎干细胞 (ESC)，有时统称为多能干细胞 (PSC)，是一种在适当微环境中具有无限自我更新能力和分化成几乎任何细胞类型的细胞。这些独特的性能使诱导多能干细胞和胚胎干细胞能够应用于疾病建模、药物发现、药物毒性测试和细胞治疗。
BDBIO 人多能干细胞培养基是一种无动物源组分，成分完全明确的无滋养层培养基，可替代Essential 8 培养基，适用于胚胎和诱导性人多能干细胞 (PSC) 的生长和扩增。
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