产品信息
适用范围 | 试剂 |
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使用方法 | (一) 细胞冻存 1. 取对数生长期的细胞,去除旧培养液,加入 PBS 清洗细胞; 2. 去除 PBS,加入适量胰蛋白酶(覆盖培养皿表面) 室温孵育 2~3 min,把单层生长细胞 消化下来; 3. 加入双倍体积的完全培养基或胰酶终止剂终止细胞消化(如果冻存细胞为悬浮细胞按照步 骤 4-8 进行操作); 4. 将消化后的细胞悬液或者悬浮细胞液转移至离心管中,进行细胞计数; 5. 室温 1000 rpm 离心 5 min;弃掉上清液。 6. 加入提前预冷好的无血清免疫细胞专用冻存液,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,调节冻存液 中细胞的最终密度为 5×105/ml-1×107/ml(供参考,可根据实际需求进行调整); 7. 将细胞分装入冻存管中,每管 1~1.5 ml; 在冻存管上标明细胞的名称,冻存时间及操作 者; 8. 将冻存细胞放入-80℃冰箱,24h 后转入移至-196℃液氮罐长期冷冻保存。(也可适用于 细胞的非程序化冻存及-80℃环境短期保存,更多类型细胞系的简化操作需验证后使用)。 (二) 细胞复苏 1. 将水浴锅温度调至 37℃,取出冻存管快速置于水浴锅内,晃动冻存管直至管中冻存细胞 融化成液体; 2. 将溶解的细胞冻存悬液转移至含有 5-10 倍体积完全培养基的离心管中,待冻存管中细胞 完全融化后,将冻存细胞悬液缓慢加入离心管中,轻轻混匀; 3. 室温 1000 rpm 离心 5 min; 去除上清液,加入已回温的完全培养基重悬细胞,进行细 胞计数,根据计数结果,取适量的细胞悬液接种到新的培养瓶内; 4. 将复苏好的细胞转移至 37℃,5% CO2 培养箱中,按常规方法培养。 |
注意事项 | 1. 试剂包装如有破损或滴漏,严禁使用。 2. 请遵守严格无菌的工作规范,操作过程避免污染。 3. 本产品适用于多种细胞类型的冻存,冻存使用前可根据实验需求进行验证。 4. 使用前应详细阅读使用说明书,在有效期内使用。 |
声明 | 仅用于科研使用,不能用于临床诊断和治疗。 |
保存条件 | -20°C保存,有效期18个月。 |
产品详情
BDBIO 无血细胞冻存液是一款化学成分明确的即用型细胞冻存试剂,经过配方特别优化,不 含血清、动物源成分及 DMSO 等,可避免 DMSO 引起的细胞毒性,同时保持细胞较高的活 力和生理活性。 适用于 DMSO 敏感的细胞系及免疫细胞、干细胞等不同类型细胞的冷冻保 存,并可保持干细胞的分化潜能。